Préambule: les informations, valeurs, tableaux, graphes et questions présentées ci-dessous ne sont qu'une partie du sujet étudiée. Certaines questions ne figurent pas dans le document support de l'activité mais ont été posées au cours des séances. Les bio-insecticides sont des moyens de lutte biologique. Ce sont des insecticides préparés à partir d'organismes vivants ou de leurs produits. L'objectif est: d'aborder l'étude de bactéries caapables de former une structure particulière (l'endospore) en effectuant une comparaison avec une souche de référence non sporulante Gram (négative). de caractériser et d'identifier la bactérie utilisée comme insecticide biologique. Validation de méthode de l’identification des Pseudomonas non aeruginosa par. 1 ère partie: orientation et identification (effectué en partie sous forme d'exercice permettant de réviser les notions des AT précédentes) 1. Voici les observations microscopiques d'un élève: cellules en forme de bâtonnet de 4 à 6 µm de long et environ 1, 5 de large, avec une zone blanche sphérique au centre de la cellule qui conserve sa forme de bâtonnet, se déplaçant selon un mouvement lent, sinueux, désordonné.
Ce milieu contient des sels biliaires et du cristal violet qui permettent d'éliminer les bactéries à gram positif. Il contient de plus un indicateur de pH (rouge neutre) et le sucre dont on veut tester la fermentation ( lactose, sorbitol, arabinose, maltose... ). La dégradation par fermentation de ce sucre provoque une acidification qui fait virer la coloration des colonies au rose vif grâce à l'indicateur de pH. Les bactéries qui ne fermentent pas le sucre testé restent à pH neutre et ont une couleur beige. La gélose MacConkey est employée entre autres pour la culture des entérobactéries et du Pseudomonas aeruginosa. sur MacConkey (lactose +) Gélose chocolat [ modifier | modifier le code] Elle n'a rien à voir avec le chocolat. Sa couleur brune est due à une solution d'hémoglobine cuite qui entre dans sa composition. La gélose chocolatée est appropriée pour cultiver certaines bactéries exigeantes en termes de facteurs de croissance. Eugon LT100 - Gélose [Par Milieux ]. En plus des globules rouges cuits qui libèrent des substances nutritives, la gélose chocolatée renferme souvent quelques additifs exigés par certaines bactéries.
Validation technique: évaluation des performances de la méthode 1) Répétabilité La répétabilité consiste à analyser un même échantillon par le même opérateur dans les même conditions avec les même réactifs et instruments le même jour. La répétabilité a été évaluée en réalisant 10 fois le dépôt de chacune des 7 souches ATCC dans les conditions standard recommandées par le fournisseur (culture de 18h sur gélose au sang) le même jour par le même utilisateur (n=70) sur la même cible. 2) Fidélité intermédiaire La fidélité intermédiaire consiste à tester la reproductibilité de la méthode. Cela consiste à analyser un même échantillon dans des conditions différentes en faisant varier au moins un paramètre: l'opérateur, le temps, les réactifs et instruments. Pour cela, les 7 souches ATCC ont été déposées en double 5 jours différents, sur 5 cibles différentes et par des opérateurs différents (n=70). Les opérateurs étaient 5 personnes habilitées au dépôt sur cible MALDI. 3) Variabilité inter-opérateurs Pour maîtriser la variabilité inter-opérateurs, il faut vérifier la formation et l'habilitation des opérateurs.
Si elles sont achetées, prêtes à l'emploi, il est important de respecter la date de péremption. Ces géloses sont conditionnées dans deux types de boite de Petri: boite ronde de 90 mm de diamètre pour tester au maximum 7 disques boite carrée de 140 mm pour tester 16 disques. Une utilisation standardisée L'utilisation des milieux Mueller-Hinton et MH-F pour étudier la sensibilité des bactéries aux antibiotiques est standardisée afin de garantir, encore une fois, la reproductibilité des résultats. Elle est présentée en détail par le Comité de l'Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie (CA-SFM) en collaboration avec l' EUropean Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST). Ce comité rédige, tous les ans, un guide que vous pouvez télécharger sur le site internet de la SFM. Voici un lien vers le communiqué d'avril 2020 du CA-SFM EUCAST. Il s'agit de: Préparer une suspension d'une turbidité équivalente à celle de l'étalon 0, 5 de Mac Farland en prélevant si possible plusieurs colonies.
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