Chromatographie sur couche mince: caractéristiques, à quoi ça sert - Science Contenu: Caractéristiques de la chromatographie sur couche mince Généralités Développement Développement et analyse du résultat À quoi sert la chromatographie sur couche mince? Processus Premier pas Deuxième pas Troisième étape Quatrième étape Cinquième étape Sixième étape Septième étape Applications Références La Chromatographie sur couche mince C'est une méthode qui permet la séparation et l'identification des substances présentes dans un mélange. La soi-disant «couche mince» est composée de gel de silice (oxyde de silicium), d'alumine (oxyde d'aluminium) et de cellulose. Identification des acides amines par chromatographie sur couche mince . Cependant, d'autres préparations peuvent être utilisées pour certaines applications. Des feuilles de verre, d'aluminium ou de plastique sont utilisées comme supports pour le film mince. Le matériau qui forme la couche mince sert de phase stationnaire de la chromatographie, c'est-à-dire celle qui reste fixe; tandis que le solvant ou le mélange de solvants utilisé constitue la phase mobile, qui se déplace avec les substances à séparer.
Si du gel de silice (polaire) est utilisé comme phase stationnaire, les substances polaires interagissent avec lui et réalisent un léger décalage pendant la chromatographie. Pendant ce temps, les substances non polaires auront un déplacement beaucoup plus important pendant la chromatographie car elles n'interagissent pas efficacement avec le gel de silice. Développement et analyse du résultat La chromatographie est terminée lorsque le solvant atteint une hauteur appropriée qui n'atteint pas la hauteur de la feuille de chromatographie. La lame de chromatographie est retirée de la chambre et le front de solvant est marqué d'une ligne. Identification des acides aminés par chromatographie sur couche mince. L'emplacement des substances sur la chromatographie sur couche mince peut être visualisé par diverses méthodes, y compris: la visualisation directe avec la lumière UV, l'utilisation de la lumière UV sur les lames traitées au phosphore, ou la soumission des lames avec des vapeurs d'iode., etc. Dans l'identification et la caractérisation des différentes substances, ce qu'on appelle le facteur de rétention (RF) est utilisé.
Ainsi, la séparation des composants dans le mélange est réalisée. Une fois la séparation effectuée, les composants individuels sont visualisés sous forme de points à un niveau de déplacement différent sur la plaque. Leur nature ou caractère sont identifiés à l'aide de techniques de détection appropriées. Composants du système Les composants du système TLC sont constitués de Plaques CCM, de préférence prêtes à l'emploi avec une phase stationnaire: Ce sont des plaques stables et chimiquement inertes, où une fine couche de phase stationnaire est appliquée sur toute sa couche de surface. La phase stationnaire sur les plaques est d'épaisseur uniforme et de granulométrie fine. Chambre CCM. Ceci est utilisé pour le développement de la plaque TLC. La chambre maintient un environnement stable à l'intérieur pour un bon développement des taches. Résultats Page 6 Chromatographie sur couche mince | Etudier. Il empêche également l'évaporation des solvants et maintient le processus sans poussière. Phase mobile. Celui-ci comprend un solvant ou un mélange de solvants.
Chromatographie: montage et vocabulaire Étape 1 Choix du support (phase fixe) et de l'éluant (phase mobile). Choix de la phase fixe (exemple: plaque d'aluminium recouverte de gel de silice). Choix de la phase mobile. C'est un solvant ou un mélange de solvants (exemple: dichlorométhane, éther de pétrole, etc. ). Étape 2 Préparation de la cuve à chromatographie et du support. On verse environ 0, 5 à 1 cm d'éluant dans la cuve à chromatographie que l'on referme avec un couvercle de manière à ce que l'éluant sature la cuve en vapeur. On trace alors un trait fin appelé ligne de dépôt (ou ligne de base) sur la plaque à chromatographie de manière à ce que ce trait soit au-dessus du niveau de l'éluant. Étape 3 Préparation des dépôts. Identification des acides aminés par chromatographie sur couche minceur. Préparation de la ligne de base Sur la ligne de base, on doit réaliser les différents dépôts: le mélange; les témoins: ce sont les produits susceptibles d'entrer dans la composition du mélange. On respecte des espaces réguliers entre chaque dépôt. On place de fines croix à l'endroit de ces dépôts et on les repère par une lettre ou un nom.
Qualitativement, cela permet d'identifier les constituants d'un mélange. Quantitativement, cela permet de donner la composition d'un mélange. Il existe plusieurs techniques chromatographiques: PHASE Philo 2984 mots | 12 pages protocole expérimental de lavage (15 min conseillées) 7 2. Elaborer un protocole d'analyse par chromatographie sur couche mince et le réaliser (25 min conseillées) 7 3. Interpréter la CCM et le spectre RMN du proton (20 min conseillées) 8 IV. REPÈRES POUR L'ÉVALUATION 9 1. Réaliser le protocole expérimental de lavage et la CCM 9 2. Elaborer un protocole d'analyse par chromatographie sur couche mince 10 3. CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (TLC): PRINCIPE ET PROCÉDURE - TIGE - 2022. Interpréter la CCM et le spectre RMN du proton 11 V. GRILLE D'ÉVALUATION 13
Filtration et rinGage abondant jusqu'a obtention de liquides limpides. Titrage potentiometrique des extraits avec de la soude N/IO. La purification par la r&sine Amberlite IR-120, permet non seulement d'itliminer les substances interferentes, mais Cgalement de determiner le pourcentage de l'aciditi: libre par rapport & la totalite des ions acides libres et salifies (la fraction salifiee pouvant &tre &gale a 60% du total). Nous avons choisi cette resine, et sous la forme Hf, parce qu'il n'y a pas retention des acides par forces de Van der Waals sur la colonne. B. Chromatographie SW rt%sime Nous avons utilise la Dowex z x 8 (200-400 mesh) forme formiate ou acetate et Clution avec l'acide formique et acetique respectivement. Nous employons l'une ou l'autre selon la complexite du milieu biologique present. Si nous sommes en presence d'un milieu ayant peu d'acides organiques, nous pouvons recourir 8. Chromatographie sur couche mince: caractéristiques, à quoi ça sert - Science - 2022. la resine dans la forme HCOO-. Cependant, dans la plupart, des cas cette &sine s'est montree assez inefficace, nous obligeant a l'utiliser dans la forme CH, COO-, en faisant l'elution avec de l'acide acetique, suivie de l'acide formique.
Troisième étape Une ligne est tracée avec un crayon graphite à une hauteur de 1, 5 cm à partir d'une extrémité de la feuille de chromatographie. Les échantillons à utiliser dans la chromatographie sont placés sur la strie au moyen d'un capillaire en verre. Quatrième étape Ensuite, la feuille de chromatographie avec les échantillons à analyser est placée dans la chambre et celle-ci est fermée avec la mise en place du couvercle en verre. Cinquième étape La remontée du mélange de solvants est observée jusqu'à ce que le front de solvant atteigne une hauteur inférieure d'environ 2 cm à la hauteur de la feuille de chromatographie. La feuille de chromatographie est ensuite retirée de la chambre et le front de solvant y est marqué d'une ligne. Sixième étape La feuille est placée dans une étuve pour le séchage et les substances présentes dans la chromatographie sont analysées en utilisant une méthode de visualisation générale ou spécifique au matériau de chromatographie. Septième étape Les valeurs Rf sont obtenues pour les différentes substances présentes, et sur la base des contrôles de chromatographie, ainsi que de la littérature à ce sujet, les substances sont identifiées.
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