ou utilise-t-elle une autre voie? Elle permet de connaître la voie de dégradation du glucose c'est-à-dire son type métabolique. Principe Le métabolisme des bactéries est recherché dans les ressources de Hugh & Leifson auxquelles on ajoute du glucose. Régénération du milieu (le milieu a été stocké trop froid pour le gaz dissous dans le milieu puisse s'en échapper). Par conséquent, il présente un gradient de concentration en oxygène (la teneur en oxygène en surface est supérieure à la teneur en oxygène en profondeur). Les bactéries qui utilisent le glucose produisent de l'acide. Le produit acide est décrit par le changement de couleur du bleu de bromothymol, qui est un indicateur de couleur du pH contenu dans le milieu. A la fin de l'incubation, on observe le changement de couleur du milieu pour déterminer le typer d'oxyde ou de fermentation. La composition du milieu Hugh & Leifson - Tryptone (2g) - Bleu de bromothymol (30mg) - Chlorure de sodium (5g) - Hydrogénophosphate de potassium (0, 3g) - Agar-agar (2, 5g) Mode opératoire Nous utilisons une culture propre pour éviter des résultats déformés.
Les bactéries sont oxydatives. 3 Tubes O et F entièrement jaunes → il y a eu virage de l'indicateur coloré à cause de la production d'acide dans tout le tube: les bactéries ont utilisé le glucose en présence et en absence d'oxygène. Les bactéries sont donc fermentatives. 4 Haut du tube O bleu → bactéries inertes au glucose: utilisation des peptides comme source d'énergie. Précisions Le type oxydatif ou fermentatif est étroitement lié avec le type respiratoire de la bactérie. On peut donc vérifier la cohérence des résultats avec le milieu viande-foie. Voir aussi Recherche du type respiratoire Portail de la biologie Recherche de la voie d'attaque du glucose
Résumé du document Le métabolisme glucidique correspond à l'ensemble des réactions, qui font intervenir les glucides en tant que substrats. Un glucide est une molécule organique composée d'atomes de C, H et O. Il comporte une fonction aldéhyde ou une fonction cétone. Il existe plusieurs sortes de glucides (... ) Sommaire I) Qu'est-ce qu'un glucide? II) Métabolisme des glucides: mise en évidence de l'utilisation des glucides III) Voie d'attaque des glucides A. Définitions B. Milieux d'étude de la voie d'attaque des glucides: les MEVAG IV) Mise en évidence de l'utilisation d'un glucide par acidification A. Principe de l'étude B. Exemples de milieux C. Milieu de base liquide: eau peptonée + glucide + indicateur de pH D. Milieux solides: milieux d'isolement E. Milieux complexes V) Etude de la fermentation d'un glucide VI) Autres tests de mise en évidence d'un glucide A. Mise en évidence de la disparition d'un polyholoside B. Mise en évidence de l'apparition d'un produit: l'esculétine C. Mise en évidence de la présence d'enzyme intervenant dans le métabolisme glucidique Extraits [... ] Le métabolisme glucidique Qu'est-ce qu'un glucide?
- souche 2: observation de bactéries polymorphes, certaines sous forme de bâtonnets très courts, d'autres presques ovalaires, roses avec coloration bipolaire, se déplaçant lentement de façon sinueuse. Interpréter les observations faites pour chacun des souches testées 2. Lecture de l'isolement réalisé sur GNO (ou GTS pour Gélose Trpypticase Soja soit TSA pour Trypticase Soy agar en anglais) milieu non sélectif sur lequel l'isolement est réalisé en dernier en jour 1) Conditions d'incubation: 36 h, 37 °C L'isoelement a-t-il été correctement réalisé? Rappel: isoler consiste à séparer les micro-organismes à la surface d'un milieu nutritif gélifié, de manière à ce que, après culture, on obtienne des colonies bien distinctes L'isolement permet-il de valider la pureté de la suspension préparée en jour 1? Observer minutieusement... Rappels: - si oui, la galerie d'orientation est validée et interprétable - si non, les résultats de la galerie ne sont pas interprétables (et donnés sous réserver, le temps de refaire la manipulation) Quelles caractères culturaux peut-on indiquer?
Fiche de lecture: Lecture du milieu Hugh & Leifson.
La souche inconnue est comparée à des espèces déjà décrites (souches-types) et le nom de l'espèce la plus similaire est proposé. Souche: c'est une population d'organismes descendant d'un organisme unique ou d'un isolat de culture pure. Au sein d'une même espèce les souches peuvent présenter des différences légères entre elles qui pourront être caractérisées sur la base: de leurs propriétés biochimiques ou physiologiques pour les biovars; de leurs propriétés antigéniques pour les sérovars; de leur facteur de virulence pour les pathovars. 4 ème partie: plan d'étude de la procédure opératoire d'orientation A partir des indications apportées dans le support d'activité (fiches techniques, chronologie des opérations), un plan d'étude est réalisé afin - de bien visualiser l'ensemble des instruments et milieux à mettre en place sur la paillasse - de ne pas perdre de temps 5 ème partie: lecture des tests effectués 1. Observations microscopiques Résultats obtenus: - souche 1: observation de bâtonnets roses, se déplaçant rapidement.
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